原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)，是細胞培養(yǎng)中很重要的，其質(zhì)量決定著傳代細胞的質(zhì)量，因此它的培養(yǎng)的質(zhì)量至關(guān)重要。
 

　　原代細胞是非常敏感的細胞，需要傳統(tǒng)培養(yǎng)基之外的額外營養(yǎng)物質(zhì)。為了優(yōu)化存活和生長，需要針對每種細胞類型選擇特定的培養(yǎng)基。例如，內(nèi)皮細胞對營養(yǎng)的需求與上皮細胞或神經(jīng)元有很大區(qū)別，因此需要特制的內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基。而傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基依靠血清提供生長因子、激素、脂質(zhì)和其他的未知組分，以支持細胞的生長。但對于原代細胞，高血清水平可導(dǎo)致細胞分化，或促進污染細胞如成纖維細胞的生長。
 

　　此外，添加血清也受到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培養(yǎng)基則可以避免這些問題，并且更加有利于促進特定類型細胞的生長。此外，其他一些實踐，例如在更多的生理學(xué)相關(guān)底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物，可以顯著的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。
 

　　實驗步驟：
 

　　1.試劑耗材準(zhǔn)備；
 

　　2.取新鮮動物組織；
 

　　3.酶消化；
 

　　4.過濾網(wǎng)篩選、分離細胞；
 

　　5.加培養(yǎng)液，37℃、5%CO2培養(yǎng)；
 

　　6.傳代；
 

　　7.凍存；
 

　　8.復(fù)蘇。
 

　　應(yīng)用：
 

　　1.為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；
 

　　2.為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；
 

　　3.服務(wù)于臨床實踐，用于藥物篩選等。